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液相色谱仪HPLC(一)紫外可见吸收检测器
发表时间:2022/3/11 10:46:52  |  点击率:2233

上篇我们有讲到高效液相色谱仪HPLC检测器的类型,其中紫外可见吸收检测器是液相色谱仪HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。

紫外吸收检测器UV检测器是液相色谱仪HPLC中最常用的检测器,它占液相色谱仪HPLC检测器使用率的75%,生产液相色谱的厂家基本都会配带这种检测器。

紫外吸收检测器UV检测器特点

● 灵敏度高,最小检测量可达10-9g/mL,也可以检测对于紫外吸收弱的组分;

● 线性范围宽,大多数UV检测器可以在1.5-2.0AU下保持良好的线性;

● 不易受温度、流速等因素的影响

● 可用于梯度洗脱

● 可与不同检测器串联使用,如双光路双流路紫外/荧光检测器(UV/FLD-1)

紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm~800nm)。它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。

局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。

总结紫外吸收检测器的优点、缺点
基于试样组分对特定波长紫外可见光的选择性吸收,组分浓度与吸光度成正比

1. 优点
① 灵敏度高,其最小检测量10-9g/mL;
② 线性范围宽;
③ 可用于梯度洗脱;
④ 波长可。子诓僮鳎
⑤ 可与任何检测器串联使用

2. 缺点
① 对紫外光完全不吸收的试样不能检测;
② 溶剂的选择受限制

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